Lonza Nucleofector 384孔细胞核转染系统
——实验室高通量细胞电转仪,高通量筛选工具
北京泽平代理的德国进口龙沙Lonza 384孔细胞核转染系统(Lonza 384-well Nucleofector System,原Amaxa HT Nucleofector System,简称Lonza 384孔电转仪),是全球知名的Lonza Nucleofector电转仪系列中的高通量电转染设备,专业用于动物细胞高通量电穿孔转染,支持1分钟内完成1-384个样本独立转染,转染细胞数量低至2E4,20μL转染体系节省电转试剂,广泛用于CRISPR/Cas9基因编辑文库筛选、RNAi、阵列cDNA、药物靶点筛选等。
Lonza 384孔高通量电转仪采用Lonza专利Nucleofector核转染技术,依据经典电穿孔转染原理,通过整合电穿孔仪器、细胞特异性电转缓冲液(电转液)、内置优化的转染程序,可将DNA、RNA、质粒、多肽、蛋白质、核糖核蛋白复合体RNP、小分子化合物等导入细胞质,并跨过核膜直接进入细胞核,因而Lonza电转仪又称核转仪。Nucleofector核转染支持对原代细胞、干细胞、神经元、难转染细胞系的高效转染,转染后细胞活率高,实验结果稳定,具备高重现性,质粒转染效率可高达90%,siRNA转染效率可达99%。Nucleofector核转染不依赖细胞有丝分|裂,表达迅速,转染GFP质粒最快2小时可观察到蛋白表达。
Fig. Primary NHDF-neo cells were transfected with labeled plasmid DNA encoding GFP, fixed after 2h in 3.5%PFA and analyzed by confocal microscopy.
Lonza Nucleofector核转染技术于2001年上市,20多年来全球发表文章超过36,000篇,广泛应用于CAR-T、CAR-NK、CRISPR-Cas9基因编辑、干细胞、外泌体药物递送的前沿研究中,帮助快速推进实验室基础研究和实现GMP级别商业化细胞产品生产。
Lonza 384孔核转仪通过对电转仪器、电转缓冲液、电转程序全方位优化,实现高通量、高效细胞电转染。
1、Lonza 384孔电转仪——高通量转染
Lonza 384孔电转仪由电转板处理单元、提供高压脉冲的电源单元、基于PC的操作软件组成。使用时,电动转盘可放置2块384孔板,将其中一块板旋转至板处理位置进行电转,每个孔可独立运行不同转染程序,1分钟完成384个样品的转染,电转后再旋转回来,按需进行第二块板的电转,以方便地进行快速、规模化处理。
电转仪软件内置根据不同细胞类型优化的电转程序,可使用PC方便地进行选择,无需设置电转仪参数如电压、电阻、电脉冲等,直接调用程序,操作简单。Lonza 384孔电转仪与Lonza 4D电转仪使用相同的电转程序,384孔电转仪摸索的转染条件,可方便地在Lonza 4D电转仪中线性放大转染体积。
2、Lonza 384孔电转试剂盒——提高转染效率和细胞活率
Lonza 384孔电转仪专用转染试剂盒,由转染试剂、补充剂、电击耗材、阳性对照质粒等组成。
①电转试剂——根据不同细胞单独优化转染液和补充剂配方,以提高转染效率和转染后细胞活率,维护细胞正常生理功能。包含5种原代细胞转染试剂(P1-P5)、3种细胞系转染试剂(SE、SF、SG),适用于所有细胞类型。同种细胞不同底物采用相同转染试剂盒,可实现多种底物共转染。
②电击耗材——采用可导电的高分子聚合物电极,相比传统铝电极,非金属电极避免了金属离子造成的细胞毒害。384孔板每孔20μL体系,可转染2*104-1*106个细胞,节省电转试剂、细胞样品。384孔板符合SBS标准,可无缝对接自动液体处理系统,提高实验效率。
3、Lonza全球共享转染数据库——丰富数据参考
免费在线数据库(https://knowledge.lonza.com),提供超过759种细胞类型的转染程序,同时提供包括细胞来源、传代、培养条件、转染程序选择和操作技巧、转染后培养、历史转染结果等,数据持续更新,加之全球科研人员海量成功案例,提供了强有力的实验参考和支持,使研究者可以专注于研究本身,快速推进实验进程。
Lonza 384孔高通量电转仪操作步骤图解
Lonza 384孔高通量电转仪参数
品牌 |
Lonza龙沙 |
产地 |
德国科隆 |
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中文名称 |
384孔细胞核转染系统 |
英文名称 |
384-well Nucleofector System |
货号 |
AAU-1001 |
用途 |
高通量转染,作为CRISPR/Cas9基因编辑文库、阵列cDNA、RNAi筛选工具 |
转染底物 |
DNA、RNA、质粒、多肽、蛋白质、核糖核蛋白复合体RNP、小分子化合物 |
转染细胞 |
动物原代细胞、干细胞、细胞系,外泌体 |
转染试剂盒类型 |
P1~P5,SE、SF、SG,2款优化试剂盒 |
电极材料 |
导电高分子聚合物 |
耗材 |
384孔板 |
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转染细胞数量 |
2*104-1*106 |
使用方法 |
1min之内完成1~384个不同样本转染,可同时设置384种不同转染程序 |
外观尺寸 |
板处理单元:40cm*42cm*15cm |
电源单元:13.5cm*50cm*45cm |
重量 |
板处理单元:10kg |
电源单元:14kg |
操作系统 |
Windows 7、10 |
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